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紫外分析仪系列,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,不同的紫外分析仪有不同的用途。紫外分析仪采用不同波长引进电泳分析、检测,PCR产物检测,DNA指纹图谱分析,纸层分析或薄层分析等
紫外分析仪系列原理及应用
紫外分析仪是荧光技术的应用,荧光技术是什么呢? 首先了解一下什么是荧光,荧光又作"萤光",是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光(通常波长在可见光波段);而且一旦停止入射光,发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。 知道了什么是荧光,顾名思义就能想到什么是荧光技术。荧光技术是某些物质受一定波长的光激发后,在极短时间内(10-8秒)会发射出波长大于激发波长的光,这种光称为荧光。这一发光现象在各方面的应用及有关的方法称为荧光技术(fluorescent technique)。
物质经过紫外线照射后发出荧光的现象可分为两种情况,第一种是自发荧光,如叶绿素、血红素等经紫外线照射后,能发出红色的荧光,称为自发荧光;第二种是诱发荧光,即物体经荧光染料染色后再通过紫外线照射发出荧光,称为诱发荧光。
荧光技术在生物化学及分子生物学研究中应用主要包括以下几个方面:
1、物质的定性:不同的荧光物质有不同的激发光谱和发射光谱,因此可用荧光进行物质的鉴别。与吸收光谱法相比,荧光法具有更高的选择性。
2、定量测定:利用在较低浓度下荧光强度与样品浓度成正比这一关系可以定量分析样品中荧光组分的含量,常用于测定氨基酸、蛋白质、核酸的含量。荧光定量测定的一个优点是灵敏度高,例如维生素B2的测定限liang可达1毫微克/毫升,这一优点使测定时所需要样品量大大减少。 这种定量测定方法还可应用于酶催化的反应,只要反应前后有荧光强度的变化,就可用来测定酶的含量及酶反应的速率等。
3、研究生物大分子的物理化学特性及其分子的结构和构象:荧光的激发光谱、发射光谱、量子产率和荧光寿命等参数不仅和分子内荧光发色基团的本身结构有关,而且还强烈地依赖于发色团周围的环境,即对周围环境十分敏感。利用此特点可通过测定上述有关荧光参数的变化来研究荧光发色团所在部位的微环境的特征及其变化。在此研究中,除了利用生物大分子本身具有的荧光发色团(如se氨酸、luo氨酸、鸟苷酸等,此类荧光称为内源荧光)以外,可将一些特殊的荧光染料分子共价地结合或吸附在生物大分子的某一部位,通过测定该染料分子的荧光特性变化来研究生物大分子,这种染料分子被称为"荧光探针",它们发出的荧光一般称为外源荧光。荧光探针的应用,大大地开拓了荧光技术在分子生物学中的应用范围。
4、利用荧光寿命、量子产率等参数可以研究生物大分子中的能量转移现象:通过该现象的研究,可以获得生物大分子内部的许多信息。
以往人们常用荧光偏振做指标来研究生物大分子动力学。人们趋于用荧光偏振随时间的衰减来研究这些问题。在这种方法中,激发光不是一连续的面偏振光,而是一偏振的光脉冲,因此测得的F∥和F是在两个不同方向上偏振的荧光随时间的衰减,它既和荧光寿命τ有关,又与分子在溶液中的运动有关,因此常表示为F∥(t)和F⊥(t)。由它们可得一相当重要的物理量--各向异性参数A(t)。由A(t)可推测生物大分子的形状、分子转动弛豫时间(即从一个定向的状态到一个无定向状态所要的时间),进而可以推知生物大分子的大小、分子在溶液中的转动角度和时间之间的函数关系。由这些结果可以研究分子之间的相互作用、分子间结合的紧密程度、蛋白质、核酸分子的解聚程度等等。
另外,荧光技术在免疫学中亦有广泛的应用。最重要的就是荧光抗体法。将某些荧光染料与血清抗体相结合,这种标记的抗体仍可专一地与相应抗原发生结合,形成的复合体具有荧光特性,从而可以确定抗原或抗体的存在及其含量。
利用荧光技术设计的紫外分析仪主要是物质的定性方面的应用,包括:
⑴在科学实验工作中检测,许多主要物质如蛋白质、核苷酸等。
⑵在药物生产和研究中,可用来检查激素生物碱,维生素等各种能;产生荧光药品质量,特别适宜作薄层分析和纸层分析斑点和检测。
⑶在染料涂料橡胶、石油等化学行业中,测定各种荧光材料,荧光指示剂及添加剂,鉴别不同种类的原油和橡胶制品。
⑷纺织化学纤维中可测定不同种类的原材料。如羊毛,真丝人造纤维,棉花,合成纤维,并可检查成品质量。
⑸在粮油,蔬菜,食品部门,可用于检查毒素(如黄qu霉素等),食品添加剂,变质的蔬菜、水果、可可豆、巧克力、脂肪、蜂蜜、糖蛋等的质量。
⑹在地质、考古等部门,可起到发现各种矿物质,判别文物化石的真伪。⑺在公安部门可检查指纹、测定密写字迹等。
暗箱式:
用途及适用范围
该仪器是提供白光和紫外光照射的装置。主要用于蛋白质电泳观察、照相。带箱内照明及相机升降装置。
结构及特点
YLN-II型荧光紫外仪带有暗箱,无需暗室,可在明室中全天候使用。该仪器下部为白光透射灯箱,白光照度大。箱体上部配备有两种波长的紫外光源,波长分别为254nm、365nm,灯管启辉快,无频闪。抽屉式可见光灯箱。
规格
1. 紫外光源照射窗口有效尺寸应不小于:反射190mm×41mm。白光光源透射窗口有效尺寸:238mm×198mm;
2. 紫外光源波长:反射:254nm、365nm;
3. 透紫灯的功率:波长为365nm的紫外灯,功率为28W;波长为254nm的紫外灯,功率为28W;
4. 紫外玻璃透光率:对波长为230nm~400nm的紫外光透过率不小于40%;
5. 各波长的紫外光源的窗口辐照度应不小于10μW/cm2;\
6. 外型尺寸(L×W×H)490×360×430(mm);
日常维护保养方法
1. 本仪器应放置在阴凉、干燥、无灰尘和无酸碱、蒸汽的地方,仪器使用环境应清洁。长时间不用应拔下电源插头,并盖上防护罩;
2. 不要将水和液体溅到仪器上;
3. 灯箱上放置被观察物的玻璃如有污秽,可用酒精棉球擦干净。
照相式
用途及适用范围
该仪器是提供紫外光照射的装置。可用于核酸电泳凝胶样品的观察、照相等方面,带紫外防护罩和相机升降装置。
结构及特点
紫外仪是在暗室中使用的紫外分析仪,该仪器配备三种波长的紫外光源,透射为300nm,反射为254与365nm,您可根据自己的需要,单独使用其中某个波长,亦可同时使用几种波长。本产品选用电子镇流器,整机重量轻,灯管启辉快,无频闪。
规格
1. 透紫外光源照射窗口有效尺寸:透射窗:200mm×150mm,反射窗:190mm×41mm;
2. 紫外光源波长:透射:300nm,反射:254nm、365nm;
3. 紫外灯功率:波长为365nm的紫外灯,功率为28W;波长为300nm的紫外灯,功率为8W;波长为254nm的紫外灯,功率为28W;
4. 电源条件:电源电压:单相正弦交流220V±22V;频率:50Hz±1Hz;
5. 输入功率:不大于220VA;
6. 外型尺寸(L×W×H)440 ×340 ×120(mm);
日常维护保养方法
1. 本仪器要放置在阴凉、干燥、无灰尘和无酸碱、蒸汽的地方。
2. 放置被观察物的紫玻璃和黑板上如有污秽,可用酒精棉球擦干净。
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